Kako napraviti dosljedno uzgoj: 9 koraka

U hemiji se razblaživa proces, kao rezultat čije je koncentracija tvari smanjena u rješenju. Sekvencijalno razrjeđivanje sastoji se od ponovljenih razrjeđivanja, što vam omogućava da brzo smanjite početnu koncentraciju. Ova metoda se koristi u eksperimentima u kojima su potrebna vrlo razblažena rješenja s tačnom koncentracijom, često određenom logaritamskom skalom ili kada je potrebno pronaći gustoću bakterija. Sekvencijalno uzgoj široko se koristi u eksperimentalnim naukama, kao što su biohemija, mikrobiologija, farmakologija, fizika.

Korake

Metoda 1 od 2:

Sekvencijalno razrjeđivanje

jedan. Odaberite odgovarajuću otapalu. Pri uzgoju je vrlo važno odabrati pravo otapalo ili međuspremnik. Mnoga rješenja mogu se digati destilirana voda, ali nije uvijek tako. Ako razrijedite bakterije ili druge ćelije, trebat će vam odgovarajuće kulturno okruženje. Izabrani međuspremnik treba koristiti sa svim uzastopnim razrjeđivanjima.

Ako niste sigurni da je bolje koristiti kao međuspremnik, zatražiti učitelja ili potražiti potrebne informacije na Internetu: možda je neko već pripremio takvo rješenje.

Image pod nazivom Učinite serijske razruke Korak 2

2. Pripremite nekoliko cijevi sa 9 mililitarskih pufera. Ove ispitne cijevi igrat će ulogu uzgoja praznina. Postavite razblažen uzorak u prvu testnu cijev, a zatim redovno prenosi rješenje u sljedeće ispitne cijevi.

Prije početka rada, korisno je označiti sve korištene cijevi koje se koriste tako da ne zbunjuju rješenja u uzgojnom procesu.

Svaka sljedeća epruveta sadrži 10 puta manje koncentriranog rješenja od prethodne. U prvoj testnoj cijevi koncentracija otopine bit će 1:10, u drugom - 1: 100, u trećem - 1: 1000 i tako dalje. Unaprijed odredite koliko vam je razrjeđivanje potrebno i pripremite odgovarajući broj cijevi.

Slika pod nazivom Učinite serijske razruke Korak 3

3. Pripremite testnu cijev sa najmanje 2 mililitare nerazređenih rješenja. Za dosljedno razrjeđivanje, ova metoda zahtijeva najmanje 1 mililita nerazređenog rješenja. Ako postoji samo 1 mililitar, nećete imati nepodijeljeno rješenje. Napišite ovu testnu cijev NR (nerazvijeno rješenje).

Prije svakog uzgoja, temeljito pomiješajte rješenje.

Slika pod nazivom Učinite serijske razruke Korak 4

4. Provedite prvo uzgoj. Tip 1 mililit nerazređene cijevi u pipetu NR i prekinuti ga u testnu cijev sa oznakom 1:10, koja sadrži 9 mililitara pufera, nakon čega temeljito miješate. Kao rezultat toga, dobit ćete rješenje, razblaženo sa 9 mililitara međuspremnika. Stoga će se koncentracija rješenja smanjiti za 10 puta.

Slika pod nazivom Učinite serijske razruke Korak 5

pet. Pripremite sledeće rešenje. Za drugo dosljedno uzgoj, uzmite 1 mililitar rješenja iz testne cijevi 1:10 i dodajte u 9 milionskih međuspremnika u testnoj cijevi 1: 100. Prethodno, pomiješajte otopinu u ispitnoj cijevi 1:10. Nakon što dodate rešenje u testnu cev 1: 100, Temeljito pomiješajte njen sadržaj. Kao rezultat, uzgajate rješenje iz testne cijevi 1:10, A vi ćete imati novo rješenje sa koncentracijom 1: 100.

Slika pod nazivom serijski razrjeti korak 6

6. Ako je potrebno, nastavite uzgajati rješenje. Ovaj se proces može ponoviti onoliko koliko ne dosežete željenu koncentraciju. Ako eksperiment treba odrediti ovisnost o koncentraciji, moguće je sekvencijalno pripremiti rješenja 1, 1:10, 1: 100, 1: 1000.

Metoda 2 od 2:

Izračun uzgoja i konačnog koeficijenta koncentracije

jedan. Odrediti koeficijent Razblaživanje konačnog rješenja. Da biste to učinili, množite sve uzastopne koeficijente uzgoja. Odgovarajuća formula ima sljedeći obrazac: D_T = D_jedan X D₂ X D₃ X ... x D_N, gde D_T - zajednički koeficijent uzgoja, D_N - N-T. Koeficijent razblaživanja.

Pretpostavimo da ste 4 puta vodio uzgoj sa omjerom 1:10. Zamjenite ovaj koeficijent u formuli i dobijte d_T = 10 x 10 x 10 x 10 = 10.000.
Dakle, nakon posljednjeg uzgoja u četvrtoj ispitnoj cijevi, rješenje je 1:10.000, odnosno konačno rastvor će biti u 10.000 manje koncentrirane od originala (nerazvijeno).

Image pod nazivom serijski razblaživanje korak 8

2. Odredite koncentraciju rješenja nakon uzgoja. Da bi se utvrdila koncentracija rješenja nakon dosljednog uzgoja, potrebno je znati početnu koncentraciju. Koristite formulu C_Konačan = C_Izvor/ D, gde C_Konačan - Koncentracija razvodnog rešenja, C_Izvor - originalna koncentracija, D - određeno iznad koeficijenta uzgoja.

Primjer: Ako je koncentracija početnog rješenja bila 1.000.000 ćelija po mililitru, a koeficijent uzgoja je 1.000, šta je jednako koncentraciji konačnog rješenja?

Koristimo formulu:

C_Konačan = C_Izvor/ D

C_Konačan = 1.000.000/1.000

C_Konačan = 1.000 ćelija po mililitru.

Slika pod nazivom serijski razblaživanje korak 9

3. Provjerite dimenziju. Prilikom provođenja bilo kakvih proračuna trebali biste osigurati da ste primili prave mjerne jedinice. Ako ste započeli iz broja ćelija po mililitru, provjerite je li rezultat i dobiven i u ovim jedinicama. Ako se izračunavate u PPM-u (PPM), rezultirajuća koncentracija također se mora izraziti u Promillu.